Microscopio de epifluorescencia
Triocular con inclinación regulable 0-40°
Ajuste de distancia interpupilar (50-75 mm) y corrección dióptrica
Óptica corregida a infinito
Revólver Séxtuple
Oculares WF10x/20
Objetivos Plano apo-cromáticos de fluorescencia 4x, 10x, 40x (R), 100x (R) (I) con corrección al infinito
Fluorescencia
Ciertas sustancias en virtud de su estructura química son capaces de emitir luz de una determinada longitud de onda tras absorber luz de una longitud de onda menor. Esta propiedad es denominada fluorescencia o epi-fluorescencia y es característica de ciertas moléculas como por ejemplo colágeno, elastina, lignina o clorofila y de una serie de compuestos químicos, los fluorocromos (FITC, DAPI,TRITC) con aplicaciones muy numerosas y variadas; entre ellas dos técnicas de rutina en laboratorios de investigación y diagnóstico para las cuales se hace indispensable el uso del microscopio de fluorescencia:
Inmunofluorescencia (IF): consiste en la detección y marcaje de determinadas moléculas de interés en biopsias o cortes histológicos mediante la utilización de anticuerpos específicos conjugados con un determinado fluorocromo lo que permite el diagnóstico de ciertas enfermedades.
Hibridación in situ con fluorescencia (FISH): consiste en la hibridación de determinados fragmentos de DNA con sondas marcadas con fluorocromos, permitiendo la detección de mutaciones y alteraciones genéticas y resultando por tanto de gran utilidad en el diagnóstico prenatal y la detección y diagnóstico de ciertos tumores.
Características técnicas
Cabezal triocular con inclinación regulable de 0-40° y giratorio 360°
Amplia y sólida base que proporciona gran estabilidad al equipo
Revólver sextuple
Objetivos plano acromáticos de óptica corregida al infinito, especialmente diseñados para aplicaciones de fluorescencia:
4x, ? (NA:0.15)
10x, ? (R) (NA:0.35)
40x, ? (R) (NA:0.75)
100x, ? (R) (I) (NA:0.90)
Torreta con diferentes posiciones intercambiables para seleccionar el cubo de filtros de excitación y emisión de la longitud de onda más adecuada al fluorocromo utilizado (ver Tabla de filtros).
Oculares WF 10x/20 mm
Distancia interpupilar 53-72 mm con corrección dióptrica ± 2 dioptrías
Sistema Köehler para iluminación transmitida con diafragmas de campo y apertura y condensador tipo Abbe con lente deslizable del camino óptico.
Diafragmas de campo y apertura para control y ajuste de la iluminación incidente.
Palanca para bloqueo de la incidencia del haz de luz sobre la muestra; permite la observación de la muestra mediante la luz transmitida sin necesidad de apagar la lámpara de mercurio y evitando una sobre exposición que podría dañar la muestra
Lámpara de alta presión de mercurio de 100 W para fluorescencia mediante luz reflejada; alojada en compartimento aparte y con tornillos de centrado.
Lámpara halógena 12 V, 50 W con regulación de intensidad alojada en compartimento aparte y con tornillos de centrado (Transmitida)
Lámpara de alta presión de mercurio 220 V, 100 W (Epi-fluorescencia): fuente de alimentación de la lámpara de mercurio con temporizador de horas de uso.
Platina mecánica de doble lecho de dimensiones 180x160 mm y desplazamiento 80x50 mm
Condensador Abbe (AN: 1.25), con lente condensadora deslizable
Iluminación tipo Köehler con diafragmas de campo y apertura
Características de objetivos
| Objetivo | 4x | 10x | 40x | 100x |
| Apertura numérica | 0.15 | 0.35 | 0.75 | 0.90 |
| Long. tubo mecánico |
? |
|||
| Grosor cubre | 0.17 | |||
| Color ref. | Rojo | Amarillo | Azul | Blanco |
| Sistema | Seco Seco Seco Seco | |||
| Distancia trabajo | 21.6 | 2.9 | 0.6 | 0.62 |
| Diámetro campo visión | 6 | 2.4 | 0.60 | 0.24 |
| Resolución | 2.24 | 0.96 | 0.45 | 0.37 |
Tabla de filtros
| Posición torreta | Filtro excitación (EX) | Filtro emisión (BA) | Espejo dicroico (DM) | Fluorocromo aplicable |
| V (verde) | 510-560 | 590 | 575 | TRITC |
| Ficoeritrina | ||||
| Bromuro de etidio | ||||
| B (azul) | 450-490 | 520 | 505 | FITC |
| GFP | ||||
| Cy2 | ||||
| BV (azul/violeta) | 400-440 | 470 | 455 | Naranja de acridina |
| Amarillo de acridina | ||||
| Alexa flúor 488 | ||||
| V (violeta) | 380-420 | 450 | 430 | --- |
| U (ultravioleta) | 330-380 | 420 | 400 | DAPI |
| Alexa flúor 350 |